Procedura de inseminare se desfășoară pe mai multe faze. Acestea sunt:
1. Pregătirea mătcilor virgine pentru inseminare. La câteva zile de la eclozionare mătcile se pun în izolator pentru a preveni ieșirea acestora la împerechere.
2. Colectarea spermei de la trântori, folosind în acest scop siringa din dotarea aparatului de inseminare. Materialul seminal poate fi păstrat fără a-și pierde viabilitatea timp de o săptămână, la temperatura camerei.
3. Imobilizarea și fixarea mătcii în piesa rotundă a aparatului de inseminat, cu capul în jos, înspre sursa de dioxid de carbon.
4. Gazarea cu CO2 și adormirea mătcii.
5. Fixarea și introducerea acului de sticlă al siringii în vaginul mătcii, circa 1-2mm.
6. Introducerea în matcă, prin acționarea mecanismului cu care este dotată siringa, a aprox. 6microlitri de material seminal.
7. Retragerea acului.
8. Luarea mătcii din piesa rotundă a aparatului și marcarea acesteia prin aplicarea unei plăcuțe cu număr sau tăierea pătrimii superioare a unei aripi.
9. Introducerea mătcii în cușcă și observarea trezirii.
10. Introducerea cutiuței în care se află matca într-un nucleu în vederea eliberării mătcii de către albinele lucrătoare.